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http://hdl.handle.net/10314/3919
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| Título: | Relatório de Estágio Curricular - Laboratório de Química Aplicada, FFUP (Porto) |
| Autores: | Pereira, Sarah |
| Palavras Chave: | Farmácia Hospitalar
enzima Acilase
Investigação
tecnicas de fluxo |
| Data: | Jan-2016 |
| Editora: | Escola Superior de Saúde |
| Relatório da Série N.º: | 047.3 PER |
| Resumo: | A automatização dos métodos químicos, recorrendo às técnicas de fluxo, possibilita o desenvolvimento de metodologias analíticas, mais eficientes e seguras, minimizando a intervenção do operador e consequentes erros associados à manipulação das amostras.
Inicialmente foi realizado um estudo quer no sistema FIA, quer no sistema SIA dos diversos parâmetros que influenciam o desenvolvimento de uma reação química, como por exemplo: os caudais, volumes de amostra, comprimento e configuração de reatores.
Seguidamente, e cumprindo o objetivo principal deste trabalho, foi avaliada a atividade enzimática da enzima Acilase I, ensaio automatizado pela primeira vez.
A enzima Acilase I catalisa a desacetilação da N-acetilmetionina (NAM), resultando a metionina. Este aminoácido é especificamente indispensável para o início da tradução. A enzima Acilase I encontra-se presente em numerosos tecidos humanos, tornando-se importante avaliar a sua atividade devido a esta desempenhar um papel nos processos de bioativação de xenobióticos, bem como nas funções fisiológicas.
Experimentalmente, através da produção deste aminoácido e promovendo a sua ligação ao reagente fluorimétrico, a fluorescamina, o composto final foi medido por fluorimetria a um comprimento de onda de excitação e emissão de 393nm e 478nm, respetivamente. A avaliação da atividade da enzima foi efetuada através da medição da intensidade de fluorescência (IF) do composto final.
A metodologia adotada foi o sistema "Análise por Injeção Sequencial (SIA)". Após otimização dos parâmetros físicos e químicos, o processo de avaliação de atividade enzimática da enzima em estudo apresenta um desvio padrão relativo de 4,8%, partindo da análise repetida (n=8) de uma solução de enzima de concentração 24,25U/L, confirmando-se a aplicabilidade deste sistema na avaliação da atividade da enzima em concentrações distintas.
Relativamente ao limite de deteção e de quantificação da enzima estudada, pôde concluir-se que é possível detetar um sinal analítico diferente do sinal de branco para concentrações de enzima ≥ 1,76U/L, e que é possível quantificar uma concentração relativamente baixa da enzima, para concentrações ≥ 5,87 U/L. |
| URI: | http://hdl.handle.net/10314/3919 |
| Aparece nas Colecções: | Relatório Estágio Lic. em Farmácia
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Ficheiros deste Registo:
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